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急性肾损伤早期标志物-NGAL

时间:2018-03-01 来源:夸克官方

u项目简介

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)是分子量为25×103的分泌蛋白,1993年于中性粒细胞内的过氧化物酶颗粒中被发现。生理条件下少量合成于骨髓中性粒细胞的中幼及晚幼阶段,炎症反应和恶性肿瘤可诱使其在多组织(如子宫、前列腺、唾液腺、肺、肾、气道及消化道上皮等)中大量生成。NGAL因其在急、慢性肾脏疾病中的生物学预警作用受到重视,被业内视为最有潜质的急性肾损伤(AKI生物标志物。近年来,其在心脑血管疾病、糖尿病等领域的研究也逐渐展开。

u临床现状

急性肾损伤(AKI)是近年来国际肾脏病学界提出来,并拟取代急性肾衰竭(ARF)的新概念。随着医学的不断发展及人们对各种原因导致的肾功能损伤的病理生理过程的深入了解,学者们认为急性肾功能下降是由于损伤导致肾脏的功能和结构的改变所引起的,而且AKI概括了从肾功能发生改变到最终肾衰竭的整个过程,基本反应了疾病的程度和发展过程。所以AKI替代ARF的基本出发点就是将这一综合征的临床诊断提前识别并进行早期干预有生物标志物改变的肾损伤可以防止病情进一步恶化防止其发展成肾衰竭但是,目前还没有AKI统一的定义、诊断及分级标准,较为公认的有RIFLE和AKIN标准。

AKI是由各种原因引起的肾功能在短时间(几小时至几天)内突然下降而出现的临床综合症。肾功能下降可发生在原来无肾功能不全的患者,也可发生在原已稳定的慢性肾病(CKD)患者,其主要发病原因是肾灌注量减少导致血流动力学介导的肾小球滤过率降低引起肾脏局部缺血和再灌注损伤,但不存在肾实质损伤。如果能及时纠正肾灌注量减少,则能逆转血流动力学损害,使肾功能迅速恢复,否则可发生细胞明显损伤而导致急性肾小管坏死(ATN)。随着科技的发展,临床的治疗及监护水平均有了很大提高,但AKI及其由此引发的合并症发病率仍居高不下,缺乏早期敏感生物标志物是有效预防和治疗AKI的主要障碍AKI是心脏体外循环术后严重的并发症之一直接影响体外循环手术患者的预后通过对体外循环术后AKI早期预测性的生物标志的研究将对改善患者的预后有着十分重要的意义

虽然目前在诊断标准、有效的预防措施、规范化的治疗、多学科联合协作模式方面取得了部分进展,但关键缺乏早期诊断的特异性生物学指标。目前主要以血肌酐水平作为诊断依据,但是,血肌酐是急性肾功能变化不敏感、不可靠的指标,只有约50%的肾功能丧失时血清肌酐浓度才发生变化同时还受到年龄进食肌肉容量及水化等影响以血肌酐作为AKI诊断和临床干预的依据显然已错失最佳治疗时机。而其它传统的生物指标,如尿常规、尿素氮、β2微球蛋白、α1微球蛋白等也受年龄、性别、机体、病理、生理状态等多种因素影响,导致其敏感性、特异性差,当这些指标出现异常时,其肾损伤已处于非常严重或不可逆的阶段,并非是及时判定肾功能变化、预测临床特征的实时指标。

uNGAL的优势

近年来研究发现,NAGL 表达于肾小管细胞,通过铁转运体结合而参与铁代谢,在肾脏发育以及肾损伤后肾小管的再生中起重要作用;在急性肾损伤及修复过程中表达增强,与肾小管损伤程度密切相关;它能在急性肾衰竭的早期判断肾功能损伤的程度,且敏感性、特异性高,对临床AKI的早期诊断、预防、治疗和改善其预后有着重要作用。NAGL是一种调控肾小管上皮细胞凋亡的蛋白分子正常情况下肾组织很少表达肾缺血后NAGL基因是上调最显著的基因之一也是过量表达最显著的蛋白之一。研究显示,急性肾损伤2小时后就可以在尿液中检测到,而血肌酐明显改变需要3-4d,由此证明NAGL比血清肌酐更早期更敏感反映AKI。有学者在一项研究中监测了635例急诊科患者的尿NGAL水平,结果发现,尿NGAL在诊断AKI具有较高的敏感性和特异性(分别为90%和99%)。其他的一些研究也都发现NGAL,是预测AKI的早期可靠的生物标志物,因此,有人认为,在所有的生物标志物中NGAL可能是最有潜质的。NGAL不仅存在于尿液中,同样也存在于血浆中,测定血浆中NGAL浓度对诊断更加有利,因为它既能避免因极度少尿带来的麻烦,又能减轻因治疗而使用利尿药等带来的干扰。但有研究显示,在并发症相对少的AKI患者中,NGAL的敏感性、特异性是比较好的,但存在并发系统性感染、炎性反应性疾病及恶性疾病等时,血NGAL水平可能会受患者自身疾病状况的影响。

NGAL不仅是急性肾损伤的重要分子标志物,同时还与多种疾病的发生相关,但许多功能及机制均需进一步明确;无论如何,NGAL在疾病中的重要性已获得大家的重视,通过与同类型疾病对比,基于先进的研究手段,NGAL在疾病发生发展中的分子机制会得以阐明,这不仅有助于在基因分子水平上深化对疾病机制的认识,也有助于将NGAL转化为各种疾病临床诊断及治疗的新靶点。

u市场分析

2011年1月,NGAL检测项目开始在欧洲主要医院开展NGAL的检测最初采用western blotting法2005年丹麦Bioporto公司首先推出ELISA商品试剂盒,可用于血清(浆)尿液的NGAL检测。目前已有适用于全自动免疫分析仪的分析系统面世应用免疫分析仪(ArchitectTriage)检测NGAL比ELISA法的诊断效能好,但其检测限要逊于ELISA NGAL尚无决定性方法,一级参考材料及通用的标准品或校准物,各系统间测定结果也存在一定差异,每个商品化分析体系都有各自的参考值范围,不利于临床医生分析结果。NGAL检测的标准化工作将是国内外研究的一个重点方向,如:建立NGAL检测的标准化程序,研究决定性方法参考方法,规定常规方法,制备合适的参考材料和标准物质等,使不同方法不同试剂盒(及批号)不同实验室的检测结果间具有可比性。

NGAL检测试剂盒的产业化彻底地改变了目前临床医生无法及时诊断患者急性肾损伤的现状,比原本临床发现检测到NGAL大大提前了20到48小时,特别是对心脏支架造影等对比剂肾病患者、ICU、肾病科等急性患者在床边一分钟检测出NGAL,及早干预病情,填补了行业内空白。目前国内已有多家试剂公司获得了中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白测定试剂盒的注册证,方法学主要以胶乳增强免疫比浊法为主,其原理是:样本中的中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白与试剂中羊抗人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白单克隆抗体的致敏乳胶颗粒反应,出现凝集反应,在特定的波长下检测其吸光度的变化,其变化程度与样本中的NGAL含量成正比。该方法选择了超敏化的抗人NGAL抗体乳胶颗粒,与抗原抗体直接反应相比,抗体包被在乳胶颗粒上与抗原反应能使敏感性更高,抗干扰性更强,且可测线性范围也更宽,且操作简单,能利用普通的生化分析仪进行检测,容易实现自动化,可在各级基层医疗机构普及和应用。

夸克为了顺应市场需求,完善客户服务,于2011年开始着手于中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白测定试剂盒的研发,时至今日已取得了很大的进展。为确保产品优良的稳定性、准确度和灵敏度等性能,我们采用进口原料,并在多家三甲医院进行了临床评估,其良好的性能得到了验证,即将投入市场。

 

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