技术支持

同型半胱氨酸的临床及应用

时间:2018-03-01 来源:网络
一、同型半胱氨酸的生物特性
    同型半胱氨酸为一种含硫氨基酸,是蛋氨酸代谢过程中的重要中间产物。于1932年由Vincent du Vigheaud从膀胱结石中分离得到,其来源于饮食摄取的蛋氨酸,是蛋氨酸循环中S-腺苷HCY水解反应后的产物,同时,又是胱硫醚β合成酶合成胱硫醚的底物。血液中的总HCY包括HCY、HCY二硫化物和胱氨酸-HCY3种形式,它们大部分以蛋白结合方式存在,小部分处于游离状态。主要通过以下两条途径进行代谢:再甲基化途径和转硫途径。有50%HCY重新合成蛋氨酸,另有50%生成半胱氨酸和α-酮丁酸。
    正常人群血浆中Hcy浓度为4.0 – 15.4μmol /L,1969年Mc Cully博士发现高胱氨酸尿症和胱硫醚尿症可弓J起全身动脉粥样硬化并可形成血栓,首次提出了同型半胱氨酸与动脉粥样硬化可能有关的观点。20世纪90年代后期,对环绕同型半胱氨酸与心血管病的关系展开了大量研究,证明了高同型半胱氨酸血症(hyperhomocysteinemina)是心血管病一个独立危险因子。
    二、 同型半胱氨酸的临床意义
    1、同型半胱氨酸与心血管疾病
  流行病学研究发现,Hcy水平和心血管危险因素及心血管疾病相关。***cy与反映动脉粥样硬化临床前期病变的IMT增厚相关,在Framingham的一项研究中发现,非空腹Hcy水平在平均年龄为70岁的老年人中是脑卒中的独立危险因素,调整了年龄、性别、收缩压、糖尿病、吸烟、房颤和冠心病史,Hcy水平在上四分位数与下四分位数者脑卒中相对危险为1.82(95%CI, 1.14-2.91)。Framingham系列研究还显示了***cy血症与颅外动脉狭窄、血管性痴呆、Alzheimer’s病、骨折和慢性心力衰竭相关。荷兰进行的一项针对7983名研究对象的短期随访表明,Hcy>18.6μmol/L者发生心肌梗死和脑卒中的相对危险度分别为2.43(95%CI, 1.1-5.35)和2.53(95%CI, 1.19-5.35),在高血压患者中相关性更明显。
  既然流行病学研究提示Hcy与心血管疾病相关,因此引发人们对于补充叶酸和维生素B12、B6能否降低心血管事件的探讨。既往有脑卒中病史患者的VISP研究没有发现常规补充叶酸、维生素B12和B6能够降低再发脑卒中的风险。2005年发表的NORVIT发现,包括叶酸在内的大剂量B族维生素不能预防心肌梗死患者的心血管疾病,甚至可能使其发生风险升高。HOPE2研究是在5522名55岁以上既往有冠心病、脑血管病、周围血管病或糖尿病人群中每天补充2.5mg叶酸,50mg维生素B6和1mg维生素B12与安慰剂对照的研究。虽然没有证明上述复合B族维生素能降低心血管死亡、心肌梗死和卒中的联合终点,但亚组分析可以降低脑卒中危险25%。与HOPE2研究结果相同的是,我们参与完成的一项荟萃分析也证实补充叶酸可有效降低脑卒中发生风险,在脑卒中一级预防中效果更明显。
对于流行病学研究和干预研究存在的差异,有人认为尽管明显增高的Hcy肯定与血栓性疾病相关,但轻到中度的Hcy增高,可能是其他导致心血管疾病的原因,如肾功能损害的继发表现,从而与心血管疾病相关联。但动物模型也证明Hcy水平和血栓性疾病相关,因此关于Hcy与血栓性疾病的关系需要进一步的研究明确。Hcy水平不仅与动脉血栓性疾病相关,还与深静脉血栓形成包括肺栓塞相关
    2、HCY与肾脏疾病
    与HCY代谢有关的酶胱硫醚β-合成酶(MS)及N5、N10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHER)广泛分布于全身组织,但在肾脏中活性最高,肾脏疾病时影响这些酶的活性和合成,导致***CY血症。Cuttormsen指出血浆中HCY70%由肾脏排除。因而肾小球滤过率的降低可明显降低HCY的清除率,使HCY升高。升高的HCY血浆浓度会造成肾血管损伤,从而在***CY血症与肾功能损害间形成恶性循环。血浆HCY在肾衰早期就可升高,并随病情的加重而明显,可达到23-25umol/L。在以透析维持的终末期肾衰患者中,HCY会进一步升高,且对补充B族维生素反应极差。
    3、同型半胱氨酸与妊娠相关疾病
    虽然妊娠期妇女体内Hcy水平较孕前显著降低,但是由于妊娠期妇女对Hcy损伤敏感性增强,所以Hcy水平轻度升高就可能导致一系列的血管损害。研究表明,血Hcy水平在妊娠早期开始下降,怀孕15-17周时,降至孕前的50%-60%,然后保持稳定水平至分娩产后2-4天恢复至孕前水平。孕前血Hcy水平下降与血液稀释以及胎儿蛋白合成需要增加有关。
    近年来发现,血浆中Hcy水平升高与习惯性流产、妊娠高血压综合症(PIH)、胎盘早剥、胎儿生长受限、胎儿畸形、死胎、早产、低体重儿等的发生密切相关。Hcy致病机理的研究为多种妊娠并发症的早期诊断、治疗提供了依据。
   4、 同型半胱氨酸水平升高与老年性痴呆症的关系
   大量研究资料表明同型半胱氨酸含量升高,或者叶酸、维生素12的缺乏,都会增大患痴呆症的危险性。弗明汉医学研究中心对1092名平均年龄为76岁的老年人调查结果表明:Hcy水平超出14ummol/L,患老年性痴呆症的危险性加倍。
     三、 同型半胱氨酸的测定方法
     1、 色谱法:1987年Stabler首先报道了气相色谱―――质谱法测定同型半胱氨酸。该法可同时测定半胱氨酸、蛋氨酸、胱硫醚和甲基甘氨酸等多种物质。虽然灵敏度、特异性好,但仪器价格昂贵而不能推广。高效液相色谱法(HPLC)是目前比较成熟且推广使用的方法,不足之处是样品处理、层析条件,使其难以标准化。Fiskertrand等首先于1993年用全自动高效液相色谱法对血浆和尿液的HCY和硫醇物进行测定。HPLC根据衍生方式(柱前或柱后衍生)、检测方法(荧光、电化学)可分为多种方法。应用HPLC准确测定同型半胱氨酸需要优良的设备、高超的技术经验和应用HPLC方法适当的时间,另外选择和制备内部质控也相当重要。
    2、 免疫学法:该法应用特异性的抗S-腺苷同型半胱氨酸单克隆技术,采用荧光偏振法或免疫法测定HCY.美国雅培公司采用全自动荧光偏振免疫技术,用AXSYM仪器检测HCY,反应原理为:正常人血浆中HCY约1%以还原型存在,70%与白蛋白结合,30%形成小分子二硫化物。血浆标本在含二硫苏糖醇的预处理液作用下,HCY、混合的二硫化物及蛋白结合型等均被还原成游离HCY形式(tHCY):tHCY在S-腺苷-L-同型半胱氨酸(SAH)水解酶和过量腺苷存在下,被转换成SAH;预稀释的SAH混合物、抗-SAH单克隆抗体及标记的荧光S-腺苷-L-半胱氨酸示踪物一同孵育,仪器自动检测偏振光的改变,即可测出标本总HCY水平。此方法快捷、操作简单、自动化程度高,可减少人为误差,具有良好的准确度与精密度,适合大多数临床实验室应用。
    3、 循环酶法
  氧化型Hcy被转化成游离Hcy,游离Hcy在CBS催化下和丝氨酸反应生成L-胱硫醚。L-胱硫醚在CBL催化下又生成Hcy、丙酮酸和NH3。该循环反应生成的丙酮酸可以用乳酸脱氢酶LDH和NADH检测到,NADH转变成NAD的速率与样品中Hcy含量成正比。该方法检测采用全自动生化分析仪,具有稳定性好、特异性高、灵敏度高、检测速度快等特点,与荧光偏振免疫法有很好的相关性。 

 

金六福彩票