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糖化血红蛋白检测在糖尿病诊断中的临床价值及检测方法

时间:2018-03-01 来源:夸克生物

糖尿病是一组病因和发病机制尚未完全明了的内分泌代谢性疾病 ,目前发病率仅次于心脑血管疾病和肿瘤 ,在我国糖尿病发病率为 2 %3 %,并以每年千分之一的速度增长。目前临床已广泛开展检测患者血糖工作。但血糖测定只代表即刻的血糖水平 ,提示患者当时的身体状况 ,并不能作为评价疾病控制程度的指标。所以长期以来,评价糖尿病长期控制水平一直是一个问题,对病情波动较大及注射胰岛素的患者尤其如此。

糖化血红蛋白(HbA1c)是血中葡萄糖与红细胞的血红蛋白相结合的产物,血糖和血红蛋白的结合生成糖化血红蛋白是不可逆反应,并与血糖浓度成正比,且保持120天左右,所以血液中 HbA1c 的浓度可反映机体内近期 2-3个月的血糖平均水平。是评价血糖控制水平的金标准。

 糖化血红蛋白的特点决定了它在糖尿病监测中有很大的意义:(1)与血糖值相平行。血糖越高,糖化血红蛋白就越高,所以能反映血糖控制水平。(2)生成缓慢。由于血糖是不断波动的,每次抽血只能反映当时的血糖水平,而糖化血红蛋白则是逐渐生成的,短暂的血糖升高不会引起糖化血红蛋白的升高;反过来,短暂的血糖降低也不会造成糖化血红蛋白的下降。由于吃饭不影响其测定,故可以在餐后进行测定。(3)一旦生成就不易分解。糖化血红蛋白相当稳定,不易分解,所以它虽然不能反映短期内的血糖波动,却能很好地反映较长时间的血糖控制程度,糖化血红蛋白能反映采血前2个月之内的平均血糖水平。(4)较少受血红蛋白水平的影响。糖化血红蛋白的测定结果以百分率表示,指的是和葡萄糖结合的血红蛋白占全部血红蛋白的比例。

糖化血红蛋白的控制标准  

糖化血红蛋白能够反映过去23个月血糖控制的平均水平,它不受偶尔一次血糖升高或降低的影响,因此对糖化血红蛋白进行测定,可以比较全面地了解过去一段时间的血糖控制水平。世界权威机构对于糖化血红蛋白有着明确的控制指标,ADA(美国糖尿病学会)建议糖化血红蛋白控制在小于7%,IDF(国际糖尿病联盟)建议糖化血红蛋白控制标准为小于6.5%,目前我国将糖尿病患者糖化血红蛋白的控制标准定为6.5%以下。

非糖尿病患者的糖化血红蛋白的水平为4-6%;许多研究发现糖尿病患者如查能将糖化血红蛋白水平降低至8%以下,糖尿病的并发症将大大降低,如果糖化血红蛋白>9%,说明患者待续性高血糖,会发生糖尿病性肾病,动脉硬化,白内障等并发症,并有可能出现酮症酸中毒等急性合并症。对预防糖尿病孕妇的巨大胎儿、畸形胎、死胎,以及  急、慢性并发症发生发展的监督具有重要意义。对于病因尚未明确的昏迷或正在输注葡萄糖 (测血糖当然增高)抢救者,急查糖化血红蛋白具有鉴别诊断的价值。对于糖化血红蛋白特别增高的糖尿病患者,应警惕如酮症酸中毒等急性合并症的发生。

因此,有关专家建议,如果糖尿病患者血糖控制已达标准,并且血糖控制状态较为了平稳,每年至少应该接受2次糖化血红蛋白检测;对于那些需要改变资料方案,或者血糖控制状态不稳定的患者,及正在进行胰岛素治疗的患者,应该每三个月进行一次糖化血红蛋白测定。

糖化血红蛋白检测方法很多,依据GHb与非GHb电荷携带差异,有离子交换高效液相色谱分析法跟电泳法,根据血红蛋白糖化基团的结构差异,有亲和层析,免疫分析法。

离子交换高效液相色谱分析法

基于HbbN末端缬氨酸糖化后所带电荷不同而建立。在中性pH条件下,HbA1c携带的正电荷相对较少,因此可通过HPLC法将其与其它组分(HbA1c,HbA1b, HbA1a,HbF,HbA0)区分开,得到分离。此方法曾应用于美国DCCT的研究,是目前检测HbA1c的金标准。

电泳法
胶体颗粒在一定条件下可以带有电荷,带有电荷的胶体颗粒可以借静电吸引力在电场中泳行,带正电荷者泳向负极,带负电荷者泳向正极,此种现象称为电泳。血清中各种蛋白质都有它特有的等电点,各种蛋白质在各自的等电点时呈中性状态,它的分子所带正电荷与所带负电荷量相等。但此方法学的弱点是:
1. 需成批进行样本分析,速度比较慢,无法进行实时检测
2. 自动化程度低,急诊插入、自动维护等功能比较欠缺。
  亲和层析法

  利用生物高分子能与相应的专一配基分子可逆结合的原理将配基通过共价键牢固地结合于固相载体上制得亲和吸附系统。带有杂质的高分子分离目的物在一定条件下,能以某种次级键与已固相化的配基结合,而杂质则不吸附,除去杂质后变换条件,又可以使待分离的高分子物质重新解离,获得纯化。
  除葡萄糖外,血液中所有的糖类都可与Hb相结合,因此该方法的检测结果为糖化血红蛋白总量,而不是HbA1c的含量。
  免疫法
  使用单克隆或多克隆抗体直接测定血红蛋白β-链上糖基化的N末端的4-8个氨基酸,因此对HbA1C上的糖基特异性好。主要应用在大型生化分析仪,优点是不需要用另购仪器,操作简单,速度快,自动化程度高。但是许多同源的糖化血红蛋白变体也有相同的N末端结构,从而会对结果造成干扰。在定标方面,需与HPLC作相关校正。

综合现在临床实验室中常用的HbA1C测定方法,因为原理的不同,测定的结果准确度、重复性都有所差异。相信随着对HbA1c实验方法标准化的重视和提高,HbA1c项目的检测在临床会得到越来越多的应用。

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